當豬肺炎支原體傳入豬群時會發生什么?

供稿:豬豬俠

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    簡介

     

    控制和根除豬肺炎支原體(M. hyo)的一個重要組成部分是對豬群中細菌脫落持續時間的評估,因其將決定引入后備母豬的時間,畜群隔離的持續時間。最重要的是,該信息將有助于制定更合理的后備母豬適應策略。盡管對實驗感染豬的排毒時間進行了評估,但對自然感染的后備母豬的豬肺炎支原體的流行病學了解不多(Pieters 等,2009; Pieters 等,新聞)。本研究旨概述在自然感染的后備母豬群體中豬肺炎支原體的感染模式和持久性。

     

    材料和實驗方法

     

    參與這項研究的豬場在保持5年以上的陰性后,在最近發生了豬肺炎支原體爆發。在該前瞻性隊列研究中,隨機選取6321日齡后備母豬,標記并連續5周,每周采集喉拭子樣本,隨后每月采集樣本。在第21110140日齡收集血清樣本。最后一次采樣發生在分娩階段,從實驗母豬和其所產的5頭仔豬收集氣管樣本。由于感染中后期對喉部感染的敏感性較差,故決定從200日齡開始采集氣管樣本,(Fablet 等,2010)。將后頸人工授精(PCAI)棒的末端插入氣管收集氣管樣本。收集樣本后,將連接件從PCAI棒上取下并插入含有0.5毫升PBS的無菌卡扣試管中,并在4℃下冷藏。為了評估肺部感染,對20頭實驗小母豬實施人道安樂死,并進行全面病理檢查。將所有喉,氣管和肺部樣本提交給愛荷華州立大學獸醫診斷實驗室,并通過定量豬肺炎支原體PCR進行測試,通過IDEXX ELISA測試血清樣品的豬肺炎支原體抗體。

     

    初步結果和討論

     

    在整個研究過程中,19頭小母豬死亡,或者由于其不符合小母豬篩選標準而在研究的不同階段被淘汰(圖1)。斷奶時,11%的小母豬感染,在284天后檢測到最后的陽性母豬。盡管最近出現豬肺炎支原體爆發,但斷奶流行率仍很低。據推測,較低的發病率可能是由于母豬飼喂抗生素,豬肺炎支原體菌株毒性較小或喉部檢測方法缺乏敏感性。第80110140170天的患病率分別為14.5%,29.7%,28.8%和4.2%。即使在爆發的情況下,這種傳播速度慢,感染水平低也是豬肺炎支原體控制的最大挑戰之一。

    鑒于早期檢測下降,決定采用更具侵入性和敏感性的診斷方法。使用喉頭拭子和氣管樣本進行并排比較。在200日齡時,喉部拭子的豬肺炎支原體檢出率為8.8%,而氣管樣品則為42.2%。在215日齡時,檢測到5.2%的喉拭子PCR陽性,而氣管樣本則為52%。后一種取樣方法似乎是慢性感染期間檢測豬肺炎支原體的更敏感的方法(Pieters等人,出版中; Fablet等人,2010)。在第245275305325340日齡時,患病率分別降至33.3%,18.75%,5.80%,0%和0%。在該研究中,4頭小母豬(6.3%)在整個研究期間保持PCR陰性;然而有證據顯示到140天時100%的小母豬出現血清轉化。這表明盡管本研究中93.4%的后備母豬至少一次喉或氣管樣本PCR陽性,但即使在連續取樣后,并不是所有暴露的后備母豬都檢測到陽性。在設計豬肺炎支原體取樣策略時(如確定“零”日齡,或在解除豬群隔離前檢測),應考慮靈敏度的限制。最后,分娩時,20頭實驗母豬和其所產的5頭斷奶仔豬,均測試為PCR陰性。

     

    21日齡時的血清陽性率為100%,表明母豬抗體轉移給仔豬。 110天時的血清陽性率為59.5%。在這些血清陽性的后備母豬中,39%的喉拭子為PCR陰性。通常在感染后4-8周可見血清轉化,故這些結果表明喉拭子法在先前的樣本中不能有效的檢測感染。相反,在110日齡時,38%的小母豬為血清學陰性,其中27%的小母豬在2149日齡間通過喉拭子檢測為PCR陽性。這表明了豬肺炎支原體血清轉化的可變性,且支持抗體應答是感染的滯后指標的事實。在140天時,血清陽性率表明100%的小母豬血清轉化,在8次不同采樣后,仍有30%的血清陽性后備母豬,通過喉拭子未能檢測到PCR陽性。

     

    215日齡時,對2頭母豬進行尸檢,對其肺部進行組織病理學檢查,結果表明淋巴細胞性細支氣管周炎,充血,原因不明的支氣管肺炎(照片1)。所有肺切片和氣管樣本PCR測試均為豬肺炎支原體陰性。在第245天和第275天,來自3頭小母豬的肺樣本未顯示肺炎支原體疾病的眼觀或組織病理學病變,且所有樣本PCR測試均為陰性。然而,在安樂死之前收集的這些小母豬的氣管樣本的PCR測試則為陽性。后一種觀察結果可能表明,與慢性感染期間的氣管樣本相比,用于檢測肺炎支原體的支氣管樣本的敏感性可能較低。

    照片1:流行性肺炎:眼觀肺部病變。來源:病理學講座,出自Pat Halbur

    1.即使豬肺炎支原體在最近傳入陰性豬群的情況下,在分娩室內仔豬感染豬肺炎支原體和排毒的可能性也很低。

     

    2.使用喉拭子,在49日齡時觀察到急性感染高峰(39%)。在215天觀察到慢性感染的峰值(52%)。

     

    3.豬肺炎支原體在暴露的豬群中緩慢傳播。即使在疫情爆發期間,陽性小母豬的比例也未曾超過52%。

     

    4.284天時,檢測到最后一次小母豬陽性。這為豬群可長時間排毒提供了進一步的證據。

     

    5.在感染中后期,喉拭子似乎缺乏檢測豬肺炎支原體的敏感性,由血清轉化和喉拭子PCR陰性所證明。

     

    6.與喉拭子相比,氣管樣本似乎是更為敏感的診斷工具。

     

    7.豬肺炎支原體抗體反應是感染后的滯后指標。


    (審核編輯: 豬豬俠)

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